江蘇省是我國生豬主產(chǎn)區(qū)之一,產(chǎn)業(yè)基礎(chǔ)良好,是全國生豬產(chǎn)業(yè)重點(diǎn)建設(shè)區(qū)域[1],近年來養(yǎng)豬業(yè)迅速發(fā)展,規(guī)?;⒓s化、標(biāo)準(zhǔn)化程度得到了進(jìn)一步提升,然而制約產(chǎn)業(yè)發(fā)展的疫病風(fēng)險(xiǎn),尤其是豬瘟、藍(lán)耳病和偽狂犬病等三種常見病毒性疾病的防控難度不斷增大[2]。多年的豬疫病防控實(shí)踐表明:單純使用疫苗很難長期控制住一種傳染病,還需要有科學(xué)的管理和監(jiān)測手段,以達(dá)到有效評(píng)估疫苗免疫水平、科學(xué)制訂或動(dòng)態(tài)調(diào)整免疫程序。為了協(xié)助江蘇省部分地市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心做好疫病預(yù)警與免疫評(píng)估工作,了解江蘇省部分規(guī)?;i場豬瘟、藍(lán)耳病、偽狂犬病三種豬病抗體水平和免疫狀況,同時(shí)為校企合作單位的客戶提供相應(yīng)的檢測服務(wù)、指導(dǎo)臨床免疫防治,江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院動(dòng)物流行病學(xué)研究中心于2014年4月份—2016年3月份的2年時(shí)間里共檢測了52個(gè)規(guī)模豬場3278份血清中的豬瘟、藍(lán)耳病、偽狂犬病抗體,基于檢測結(jié)果的分析為規(guī)?;i場有效防控這三種豬病提出了一些建議。
1材料
1.1血液樣品
采集于江蘇省部分規(guī)模化豬場,自然析出血清或2500~3000r/min離心5min分離血清,-20℃保存,待測。
1.2檢測試劑
豬瘟、豬藍(lán)耳病、豬偽狂犬病ELISA抗體檢測試劑盒,均購自美國IDEXX公司。
1.3主要儀器
自動(dòng)酶標(biāo)儀(型號(hào)為SUNRISE),購自帝肯上海貿(mào)易有限公司;自動(dòng)酶標(biāo)洗板機(jī)(型號(hào)為DRW-320),購自無錫華衛(wèi)德朗儀器有限公司;離心機(jī)(型號(hào)為SIGMA2-5),購自Sigma公司;BRAND單道及8道移液器,購自普蘭德(BRAND)上海貿(mào)易有限公司。
2方法
檢測方法按照IDEXX檢測試劑盒使用說明書進(jìn)行,結(jié)果按照試劑盒給出的條件進(jìn)行判定。
3結(jié)果與分析
3.1豬瘟抗體檢測結(jié)果
共檢測血樣3278份,按豬群不同階段統(tǒng)計(jì)陽性率(阻斷率≥40%),結(jié)果見表1。
由表1中數(shù)據(jù)可知,送檢樣品陽性率較低,主要集中在保育豬與育肥豬階段。育肥豬尤其是育肥中期不合格的樣本占較高比例,這就為后期的豬瘟防控帶來了較高的壓力。從時(shí)間段上比較豬瘟抗體陽性率可以看出,2015-04—2016-03時(shí)間段總體抗體水平優(yōu)于2014-04—2015-03時(shí)間段的抗體水平。
3.2藍(lán)耳病抗體檢測結(jié)果
共檢測血樣3132份,其中未做疫苗血樣209份,按豬群不同階段統(tǒng)計(jì)陽性率(S/P≥0.4),結(jié)果見表2;按S/P值統(tǒng)計(jì)不同階段豬只所占比例,結(jié)果見圖1。
由表2中數(shù)據(jù)可知,藍(lán)耳病抗體陽性率最高的是種豬,其次為保育豬,產(chǎn)房仔豬陽性率最低。保育豬藍(lán)耳病抗體陽性率較高的原因:一是經(jīng)過了產(chǎn)房階段的免疫;二是保育階段的野毒感染。但試劑盒檢測并不能區(qū)分是疫苗免疫造成的陽性率高還是野毒感染造成的陽性率高,兩個(gè)原因都可以造成較高的陽性率。
由圖1可知,S/P值在2.1~2.5之間時(shí),保育豬所占比例最高,為22.54%,其次是種豬,為18.32%,仔豬最低,為2.76%。S/P值在2.6~3.0之間時(shí),種豬和保育豬所占比例分別為8.65%和8.36%,差異不顯著(P<0.05)。
3.3偽狂犬病抗體檢測結(jié)果
共檢測血樣3157份,其中檢測偽狂犬gB疫苗抗體3157份,檢測偽狂犬gI(gE)野毒抗體3123份。按豬群不同階段統(tǒng)計(jì)陽性率(S/N值≤0.6),結(jié)果見圖2。
由圖2可知,規(guī)模化豬場偽狂犬(gB)疫苗抗體水平普遍比較理想,但偽狂犬gI野毒抗體的檢測出率在部分場和地區(qū)檢測出率較高,尤其是種豬和育肥豬,其陽性率分別為85.63%和78.80%。這個(gè)數(shù)據(jù)應(yīng)該引起足夠的重視,有的豬場其種豬和育肥豬野毒陽性率竟高達(dá)100%,其中不乏一些新建的場。
4討論與建議
4.1豬瘟的防控
從檢測結(jié)果看,豬瘟的免疫效果不是十分理想。保育豬的豬瘟抗體水平較低,在55~60日齡二免前水平較低,是由于首次免疫后豬瘟抗體水平上升較慢,在保育階段結(jié)束前(70日齡左右)允許有一定低水平的個(gè)體存在,原因是二免后抗體水平2周后可達(dá)較高效價(jià)。而育肥豬豬瘟抗體水平較低,原因則是多方面的,可從種豬是否存在持續(xù)性感染、免疫程序是否合理、疫苗的質(zhì)量、免疫方法等方面查找原因,尤其要杜絕免疫失敗帶來的負(fù)面影響[3]。結(jié)合檢測數(shù)據(jù)與走訪調(diào)查發(fā)現(xiàn),部分豬場存在免疫不按規(guī)范操作且隨意加大免疫劑量的情況,總是對(duì)疫苗的質(zhì)量產(chǎn)生懷疑,認(rèn)為大劑量可以使豬瘟的抗體水平一直增高而達(dá)到更好的免疫效果,殊不知大的免疫劑量可以導(dǎo)致機(jī)體對(duì)豬瘟疫苗的免疫麻痹,并不能誘導(dǎo)較高水平的豬瘟抗體[4]。此外,免疫程序不合理也比較多見。有的豬場在保育舍做首免,有的是在產(chǎn)房前20d做首免,有的是超免,首免日齡最好根據(jù)母源抗體水平而定,并不是盲目地照搬,尤其是超免,在不能確保仔豬逐一免疫到位的情況下,超免并不能起到好的效果,反而會(huì)造成了人力、物力、財(cái)力的浪費(fèi)。
建議豬場加強(qiáng)經(jīng)產(chǎn)母豬的免疫,可實(shí)行跟胎免疫與普免相結(jié)合的方法,防止漏免,提高妊娠期間母源抗體水平,保證仔豬獲得足夠的母源抗體。同時(shí),產(chǎn)房仔豬首免日齡應(yīng)根據(jù)母源抗體水平而定,可以分階段檢測仔豬的母源抗體,如14,21,28日齡三次采血進(jìn)行抗體檢測,確定首免日齡,間隔21~28d后進(jìn)行二免。此外,豬群處于亞健康狀態(tài)時(shí)不要注射疫苗,豬瘟疫苗最好是單獨(dú)免疫,以防與其他病毒性疾病疫苗間相互干擾,影響抗體水平提升的速度。
4.2藍(lán)耳病的防控
根據(jù)IDEXX試劑盒大量檢測數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析來看,對(duì)于免疫經(jīng)典疫苗種豬(公豬、后備公母豬、經(jīng)產(chǎn)母豬),如果S/P值≥2.5,應(yīng)暫停引入繁殖群。對(duì)于商品豬,當(dāng)0.4≤S/P≤2.0值才認(rèn)為是比較好的水平[5-6]。值得一提的是IDEXX試劑盒只檢測藍(lán)耳病病毒的N蛋白,反映的是豬群藍(lán)耳病毒的活躍程度,其S/P值的高低和陽性率與疫苗的保護(hù)性并不是正相關(guān)。檢測中也發(fā)現(xiàn)一個(gè)現(xiàn)象,同階段的豬群如
果藍(lán)耳病抗體S/P值較高,其豬瘟抗體阻斷率<40%(不合格)的概率較高。可以考慮是否有藍(lán)耳病野毒感染而干擾了豬瘟疫苗的免疫效果。不過也不必過于擔(dān)心,仔細(xì)觀察豬群的健康狀況,如母豬是否流產(chǎn)、仔豬是否感染等再做進(jìn)一步處理,豬群健康穩(wěn)定是最重要的原則。此外,在被檢的3132份血樣中,有209份是沒有免疫過藍(lán)耳病疫苗的,但其陽性率也達(dá)到了32.33%,表明在當(dāng)前普遍免疫藍(lán)耳病疫苗的趨勢下,要想保持藍(lán)耳病陰性場,其防控壓力是相當(dāng)大的。
建議豬場在加強(qiáng)種豬免疫的同時(shí),定期檢測仔豬藍(lán)耳病母源抗體水平,制訂合理的免疫程序。在藍(lán)耳病病毒比較活躍的豬場要謹(jǐn)慎選擇疫苗,應(yīng)只選擇一種疫苗毒株進(jìn)行免疫,不要經(jīng)典毒株與高致病性毒株同時(shí)使用。
4.3偽狂犬病的防控
偽狂犬病在當(dāng)前的流行狀況下引起了不少養(yǎng)豬人的疑惑:疫苗免疫強(qiáng)度越來越高,很多豬場種豬的免疫已做到了一年普免4次,商品豬做了滴鼻、二免甚至是三免,但采血檢測疫苗抗體水平較高且整齊度好,而野毒陽性率也較高。研究結(jié)果表明:偽狂犬病
毒變異后毒力增強(qiáng)了,疫苗的種類與當(dāng)前流行毒株不匹配,疫苗的抗原濃度達(dá)不到規(guī)定的免疫劑量,人為的免疫失敗以及生物安全措施不到位等一系列原因值得我們深入思考與研究[7-8]。
建議豬場加強(qiáng)引種檢測,杜絕偽狂犬野毒抗體陽性的豬進(jìn)場。同時(shí)制訂科學(xué)的凈化方案,每年2~3次(或每個(gè)季度1次)分階段檢測偽狂犬疫苗抗體和野毒抗體水平,采樣群體以育肥豬和種豬為主,尤其是種公豬也要全部檢測,及時(shí)淘汰胎齡高的母豬,根據(jù)結(jié)果或隔離凈化或淘汰(按用途)。選擇好的疫苗進(jìn)行免疫,不要因?yàn)槊庖叽螖?shù)增多而選擇所謂便宜的產(chǎn)品來降低成本,其中的道理很簡單,能免3次解決問題的絕不免疫4次,這樣做既減少了豬群的免疫應(yīng)激與免疫耐受,也節(jié)約了人力、物力與財(cái)力。對(duì)商品豬沒有做二免的豬場,如果保育豬和育肥豬呼吸道問題較多,在做好藍(lán)耳病免疫的同時(shí),可考慮做偽狂犬二免,尤其是在感染壓力大的情況下,甚至要進(jìn)行第三次偽狂犬疫苗免疫。
規(guī)模養(yǎng)殖是時(shí)代發(fā)展的必然趨勢[9],面對(duì)當(dāng)前疫病流行的復(fù)雜狀況,如何采取有效的免疫預(yù)防和科學(xué)的診斷方法是動(dòng)物健康養(yǎng)殖的需求,也是養(yǎng)豬人應(yīng)該思考的問題。緊跟時(shí)代步伐,積極轉(zhuǎn)變養(yǎng)殖觀念,定期檢測不同階段豬群的抗體水平,動(dòng)態(tài)調(diào)整免疫程序,確保豬群有較高的免疫水平及免疫整齊度,從而建立疫病的預(yù)警機(jī)制,不失為明智的選擇。
參考文獻(xiàn):
[1]張冬冬,張海燕,徐迪,等.皖南地區(qū)常見豬病的抗體水平監(jiān)測與分析[J].綿陽師范學(xué)院學(xué)報(bào),2016,35(2):68-72,78.
[2]李央群,張翔,范益飛,等.幾種常見豬病抗體水平檢測分析[J].浙江畜牧獸醫(yī),2009,34(3):3-5.
[3]李曉林,王相芹,劉杉杉,等.山東和河北部分地區(qū)四種豬病的血清學(xué)調(diào)查[J].中國動(dòng)物檢疫,2015,32(9):4-6,15.
[4]修金生,吳順意,周倫江,等.不同規(guī)模豬場種豬豬瘟抗體檢測與豬瘟凈化[J].福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2010,25(2):235-238.
[5]王宏燕.兩種不同ELISA法在檢測豬繁殖與呼吸綜合征抗體中的選擇與應(yīng)用[J].現(xiàn)代畜牧獸醫(yī),2014(4):60-62.
[6]王艷豐,張丁華,李燕,等.河南某規(guī)?;i場FMD、PCVD、PRRS、PR疫苗免疫抗體檢測與分析[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2015,36(6):167-170.
[7]周緒斌,雷健良,周克鋼,等.2008年中國11省市規(guī)?;i場偽狂犬病野毒血清流行病學(xué)系統(tǒng)監(jiān)測與分析[J].養(yǎng)豬,2009,42(6):57-62.
[8]向廣韜,孫元,羅玉子,等.我國豬偽狂犬病變異株研究概況[J].中國豬業(yè)科學(xué),2016(8):10-14.
[9]胡小平,高洪洋.我國生豬規(guī)模化養(yǎng)殖趨勢成因分析[J].四川師范大學(xué)學(xué)報(bào)(社會(huì)科學(xué)版),2015,42(6):38-43.